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              白益生物--論elisa試劑盒的操作技巧

              發布時間:2022-07-06   點擊次數:100次

               

              ELISA試劑盒在國內有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯免疫試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒、酶聯免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是 ELISA檢測試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒等;ELISA試劑盒適用于體外定性檢測血清或血漿等樣本中的目的蛋白或者其它待測物,自從60-70年代問世以來,得到眾多科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內生化領域的長足發展。Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。為了保證ELISA試劑盒實驗質量,我們需要掌握一些小技巧以助于實驗的成功,那么ELISA試劑盒的操作技巧您知道嗎?


              白益生物公司總結了ELISA試劑盒的17種操作技巧,如若您掌握了這些實驗技巧之后,在做ELISA實驗中,試驗起來會更熟練,大大的降低了實驗過程中的風險,ELISA試劑盒實驗的入門新手掌握了這些知識后,操作起來都會快的多。


              ELISA試劑盒17個相關操作技巧如下:


              1.切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

              2.合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。

              3.在吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。

              4.務必做雙孔實驗,這樣才既能保證數據的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。

              5.樣品稀釋液應用加液器加注,并經常校對其準確性。

              6.為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。

              7.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的辣根過氧化物酶工作液。

              8.ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗徹底。

              9.剩余樣品及廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。

              10.ELISA試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。

              11.每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。

              12.手工洗板時每次加入洗滌液后。應靜置15~30s,不要將一個酶標孔中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。

              13.對樣本的結果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。

              14.用去離子水或雙蒸水配制溶液,切勿使用自來水。

              15.在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。

              16.吸取液體時速度不易太快,以免產生氣泡,ELISA試劑盒吸取的量不夠準確。

              17.吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。


               

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