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              按這個步驟操作elisa檢測試劑盒,簡單易懂!

              發布時間:2022-08-28   點擊次數:11次
                elisa檢測試劑盒的發展依托于試劑生產技術不斷進步更新和型標記物的應用。目前,分子生物學正在并最終肯定會讓我們對整個生命科學有一個全面而徹底的認識,其對免疫測定技術發展的影響也是直接而又有效的,它使我們對以前一些難以檢測的生物活性物質的測定變得輕而易舉,并且大大提高了檢測的靈敏度和特異性。
               

               

                elisa檢測試劑盒的原理:
                本試劑盒系由預包被豬瘟病毒重組E2蛋白的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,應用酶聯免疫法(ELISA)原理檢測豬血清、血漿樣本中豬瘟病毒抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本,經溫育后若樣品中含有豬瘟病毒抗體,則將與酶標板上抗原結合,經洗滌除去未結合的其他成分后;再加入酶標記物,與酶標板上抗原抗體復合物發生特異性結合;再經洗滌除去未結合的酶標記物,在孔中加TMB底物液,與酶反應形成藍色產物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關;加入終止液終止反應后,產物變為黃色;用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值,即可知樣品是否含有豬瘟病毒抗體。
               
                elisa檢測試劑盒的操作步驟:
                1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。
                2.取所需用量酶標板條,設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
                3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
                4.混勻,置37℃反應30分鐘。
                5.扣去孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌5次,拍干。
                6.每孔加酶標記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應30分鐘。
                7.洗滌,同步驟5。
                8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應10分鐘。
                9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調零,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。

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